子宫内膜异位症并不孕患者腹腔液淋巴
细胞及其白细胞介素-2的变化

张淑芝  王慧贤  孟藏者   

【摘要】  目的   探讨腹腔液中淋巴细胞转化活性及其释放白细胞介素-2(IL-
2)的含量与子宫内膜异位症患者不孕的关系。方法  采集15例子宫内膜异位症不
孕患者(异位症组)及13例健康生育妇女(对照组)的腹腔液，用形态学观察法测定
腹腔液中淋巴细胞转化活性，以生物活性检测法测定腹腔液、腹腔液中淋巴细胞
培养上清液的IL-2含量。结果   异位症组淋巴细胞转化率较对照组明显增高
(P〈0.001)；异位症组腹腔液及淋巴细胞培养上清液中IL-2的活性明显高于对照
组(P〈0.01, P〈0.001)。异位症组淋巴细胞转化率与淋巴细胞培养上清液中IL-2
活性有明显的直线正相关(P〈0.001)。结论  IL-2的含量增加可能是异位症不孕的
重要因素。

【关键词】  子宫内膜异位症    不育，女(雌)性     白细胞介素-2    淋巴
细胞转化
Alteration of Peritoneal Lymphocyte Transformation and its Interleukin-2 Release in
Patients with Infertility and Endometriosis    Zhang Shuzhi,Wang Huixian, Meng Cangzhe.
The Second Hospital of Hebei Medical University, Shijiazhuang 050000

【Abstract】  Objective  To study the relationship between alteration of peritoneal
lymphocyte transformation activity, its interleukin-2(IL-2) release and infertility associated
with endometriosis. Methods  Peritoneal fluid was collected from 15 infertile patients
with endometriosis (endometriosis group) and 13 normal fertile women (control group).
Lymphocyte transformation activity were determined in peritoneal fluid by morphometry.
IL-2 contents were determined in peritoneal fluid and supernatants of cultured pelvic
lymphocytes by biological method. Results  Lymphocyte transformation activity
reinforced (P〈0.001) and IL-2 contents increased in peritoneal fluid and supernatant
of cultured pelvic lymphocyte in the endometriosis group than those in the control group
(P〈0.01, P<0.001 respectively). There is significant positive correlation between l
ymphocyte transformation rate and IL-2 activity of cultured supernatant in endometriosis
group (P?.001). Conclusion  The increase of IL-2 content in the samples of endomet
riosis may play an important role in infertility with endometriosis.

【Key words】  Endometriosis    Infertility, female     Interleukin-2  
Lymphocyte transformation
子宫内膜异位症(异位症)是不孕的常见病因之一。除一部分异位症妇女受孕过程遭
受机械性干扰外，其引起不孕的确切原因，特别是轻微异位症，至今仍不十分清楚。
有学者认为可能与免疫因素有关，一些细胞因子与本病发生、发展及引致不孕有重
要的关系^［1］。本研究通过分析异位症并不孕患者腹腔液淋巴细胞转化活性及腹腔
液、腹腔液中淋巴细胞培养上清液的白细胞介素-2(IL-2)的变化，探讨T淋巴细胞的
机能变化与异位症不孕之间的关系。

资料与方法

一、研究对象

随机选取1993年1月至1993年7月在我院妇产科住院患者。其中子宫内膜异位症不孕者
(异位症组)共15例，均经B型超声、诊断性刮宫、基础体温测定、输卵管通液术，男
方精液分析等检查，排除了生殖器官发育不良、输卵管阻塞、内分泌失调、男方不育
等因素，经腹腔镜检查确诊为异位症，不孕时间均在两年以上。按1985年美国生殖协
会的分期标准分期^［2］，Ⅰ期者6例，Ⅱ期者9例。对照组为健康生育期要求绝育的妇
女，共13例，均曾足月分娩两次。

异位症组与对照组年龄为33.6±6.6岁(±s，下同)，32.8±4.0岁，经统计学处理，两者
差异无显著性。

二、方法

　　1.腹腔液采集：均在月经周期的第7～13天。在腹腔镜直视下，以无菌操作技术抽
吸异位症组及对照组妇女的腹腔液。将所取腹腔液离心，取沉积细胞计数与培养，吸取
离心后腹腔液-20℃冻存，待测IL-2活性。

　　2.IL-2诱生：取腹腔液沉积细胞用Hanks液洗涤两次，然后将其置入含有10%小牛血
清的细胞培养基(RPMI 1640，美国GIBCO公司产品，型号14072)中，经37℃温箱孵育1小
时，使贴壁的细胞与未贴壁的细胞分开。将未贴壁的细胞取出置入含10 μg/ml刀豆素A
(ConA,美国Sigma公司产品)及10%小牛血清的RPMI 1640培养基中，按2×10⁶个/ml细胞配
成淋巴细胞悬液，37℃培养48小时，收取培养上清液，待测IL-2活性。

　　 3.IL-2活性的测定^［３］：将DBA/2小鼠脾脏磨碎后配成5×10⁶个/ml单细胞悬液，加
入含ConA 10 μg/ml及含10%小牛血清的RPMI 1640的培养基，37℃培养48小时后，制得
IL-2反应细胞。将上述反应细胞配成1×10⁶个/ml的细胞浓度，加入96孔板，每孔100 μl，
再分别加入待测IL-2的腹腔液和淋巴细胞培养上清液100 μl，每份标本重复2孔。放入
37℃二氧化碳培养箱中培养48小时，在培养结束前8小时，加入0.5 μCi/50 μl ³H-胸
腺嘧啶核苷(³H-TdR，购自中国科学院原子能研究所)。培养结束后，用多头细胞收集器
收获细胞至49型玻璃纤维滤纸上，80℃烤箱烘烤30分钟，然后将其放入闪烁瓶内，于液
体闪烁计数仪上测定各孔样本的每分钟计数率(cpm)。再通过查标准曲线，确定IL-2活性
单位(参比山东医学科学院产IL-2单位)。实验的批内误差?%。

    4.淋巴细胞转化试验：取腹腔液中分得的未贴壁的淋巴细胞，调整至2×10⁶个/ml的
浓度，于含10 μg/ml ConA及10%小牛血清的RPMI 1640培养基中培养72小时，离心得沉
积细胞，涂片经姬姆萨-瑞氏染色，油镜下观察淋巴细胞转化率。镜下观察，转化的淋巴
细胞体积增大，直径约12～20 μm，形态不整齐，常有小突起，核变大，染色质疏松，
明显出现核仁，胞浆变宽。核与胞体比例变小，胞浆呈明显强嗜碱性，常出现胞浆空泡。
根据淋巴细胞的形态观察，计算淋巴细胞转化率，公式如下：淋巴细胞转化率=［转化的
淋巴细胞数/(转化的淋巴细胞数+未转化的淋巴细胞数)］×100%。

    三、统计学方法

    采用完全随机设计的t、t′检验及直线相关分析法。

结果

一、IL-2活性的测定结果

    异位症组腹腔液及腹腔液中淋巴细胞培养上清液的IL-2活性，明显高于对照
组，二者比较，差异有显著性，见附表。

   

附表 腹腔液及腹腔液中淋巴细胞培养上清液
IL-2活性比较(kU/L， ±s)