许多现象提示，妊高征(PIH)不仅有较强的遗传倾向性^［1］，而且胎盘-胎儿单位的肾素-血管紧张素系统(RAS)与本病的发生、发展有密切关系^［2，3］。作为RAS系统关键酶之一的血管紧张素转换酶(ACE)在PIH孕妇血中明显升高，其不仅可催化血管紧张素Ⅰ转变为血管紧张素Ⅱ(AT_Ⅱ)，并且降解缓激肽，从而间接导致前列腺素(PG)系统的紊乱，在病程发生、发展的过程中起十分重要作用。为了解胎盘-胎儿单位在PIH发生、发展中的作用，我们对PIH新生儿及PIH孕妇的配偶ACE基因缺失多态性进行了调查，现将结果报告如下。
　　一、资料与方法
　　1.研究对象：观察组：1994～1995年间在本院分娩的PIH新生儿30例，其中重度PIH 7例，中度PIH 13例，轻度PIH 10例；PIH 孕妇的丈夫18例。PIH的诊断标准按中国第二届妊高征防治科研协作会议所订标准^［4］。对照组：1996～1997年在本院分娩、无妊娠并发症的新生儿脐血40例，由本院血库提供正常男性献血员血标本78例。
　　2.基因组DNA的提取：从白细胞中提取DNA^［5］。经测定DNA的质、量均符合聚合酶链反应(PCR)要求。
　　3.PCR反应：反应的引物设计及反应条件的设定均参照Tiret等^［6］文献资料；DNA-PCR反应药盒及TC-1型热循环仪均由美国Perkin Elmer公司生产。
　　4.结果判断：PCR反应产物在1.5%琼脂糖凝胶上用100V电泳45 分钟，在紫外线透视下可清楚显示PCR产物。如仅出现490 bp片断，说明受检标本的ACE基因为插入型纯合子(insertion/insertion, Ⅱ)；仅显示190 bp片段为缺失型纯合子(deletion/deletion, DD)；同时出现上述两条片段者为杂合子(deletion/insertion, DI)。根据上述观察结果来判断ACE基因的缺失多态性。全部标本均扩增出与上述预期分子量相符的DNA片段，数据可供进一步分析研究所用。
　　5.统计学方法：采用χ²检验。
　　二、结果
　　观察组ACE基因均以DD型占优势，其中新生儿为53.3%，丈夫为72.2%；而对照组中正常新生儿及男性ACE基因均示DD型基因所占比例较低，分别为20.0%和20.5%。两组差异有显著性，见表1，2。
　　由于ACE基因均为显性基因，为了更清楚地显示其16内含子中片段缺失的作用，我们以等位基因为单位，进一步分析了等位基因的缺失多态性与PIH关系。结果表明，观察组的D型等位基因出现频率［新生儿为0.73(基因数为44)，PIH孕妇丈夫为0.8。(基因数为29)］明显高于对照组［新生儿为0.38(基因数为30)，孕妇丈夫为0.40(基因数为61)］。两组比较，差异有极显著性(P<0.001)。
　　观察组的I型等位基因出现频率新生儿为0.27(基因数16)、PIH孕妇丈夫为0.20(基因数7)，对照组新生儿为0.63(基因数50)、孕妇丈夫为0.60(基因数95)。
　　三、讨论
　　1.PIH与胎盘-胎儿单位的ACE基因缺失多态性关系：PIH是一种有较强遗传倾向^［1］、病因尚未完全阐明的特发于妊娠期的疾病。在临床上观察到终止妊娠后病情好转，症状消失；即使胎死宫内也会使症状、体征迅速减轻至消失。张振钧等^［2］发现，PIH病例的脐血中AT_Ⅱ的浓度明显高于正常孕妇分娩的新生儿，推测RAS的关键酶——ACE与这些现象有关。根据Tiret等^［6］研究，正常人血中ACE的浓度主要同该基因内16内含子其中一段287 bp序列的缺失多态性有关，即DD型个体血中的ACE浓度明显高于DI及Ⅱ型。在我们的研究中发现，PIH孕妇的ACE基因亚型以高表达的DD型为主^［3］，提示PIH与ACE基因的缺失多态性有关。我们推测，由于胎盘本身是肾素高表达单位^［7］，在胎盘-胎儿单位因遗传因素而成为ACE高表达系统时，会导致RAS系统过度活跃，和PG系统功能紊乱，造成血管收缩，在一定程度上在PIH的触发发病、加重病程过程中起作用。由于本研究中PIH新生儿中ACE基因亚型以DD型为主，因此可以认为胎盘-胎儿单位的ACE基因缺失多态性与PIH有一定的相关性。
　　2.PIH患者与其丈夫ACE基因缺失多态性的关系：PIH孕妇与其丈夫ACE基因均以DD型为主，提示在PIH的家庭中有DD型ACE基因共享的机率较高。这从另外一个侧面提示，胎盘-胎儿单位在PIH发病中的重要地位，并且当出现DD型ACE基因夫妇共享时，发生PIH风险系数增大，因此丈夫的ACE基因遗传特征可间接影响到PIH发生。上述推论尚待进一步证实。

参考文献

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　2　张振钧，葛柏青.妊高征与血管紧张素Ⅱ关系的研究.实用妇科与产科杂志，1990，5：251-252.
　3　朱铭伟，夏燕萍，程蔚蔚，等.妊高征孕妇血管紧张素转换酶基因的缺失多态性研究.中华妇产科杂志，1998，33：83-85.
　4　郑怀美主编.妇产科学.第3版.北京：人民卫生出版社，1992.113-114.
　5　Sambrook J, Fritsch EF, Maniatis T. Molecular cloning: laboratory manual. 2nd ed. New York: Cold Spring Harbor Laboratory, 1992.17-18.
　6　Tiret L, Rigat B, Visvikis B. Evdidence from combined segregation and linkage analysis that a variant of the angiotensin I-converting enzyme (ACE) gene controls plasma ACE levels. Am J Hum Genet, 1992, 51:197-205.
　7　Paul M, Wagnes J, Dzau VI. Gene expression of renin-angiotensin system in human tissues: quantitative analysis by the polymerase chain reaction. J Clin Invest, 1993, 91:2058-2064.

(收稿：1997-07-03　　修回：1998-06-16)